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用尊龙凯时的ARENA系统测定左旋咪唑毒性

发布时间:2025-03-10   信息来源:尊龙凯时官方编辑

左旋咪唑是一种合成驱虫药,广泛应用于兽医学中,治疗由线虫引起的寄生虫感染。作为一种驱虫药,其主要靶点是线虫的乙酰胆碱离子通道受体。除了在医学上的应用外,左旋咪唑还广泛应用于各个研究领域,尤其是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中。它能够诱导这些线虫的瘫痪,这对于研究神经元功能和肌肉生理学具有重要价值。

用尊龙凯时的ARENA系统测定左旋咪唑毒性

为了深入了解毒理学实验,以下是一个利用左旋咪唑的实验示例,研究人员可将此例作为框架,进行不同可溶性药物的毒性研究。

实验材料

- 带盖6孔板
- NGM培养基
- M9缓冲液
- 左旋咪唑原液: 100mM水溶
- 同步成虫种群
- wMicroTracker Arena设备

简易操作

1. 微孔板制备:按照标准程序制备NGM;
2. 加入盐和胆固醇后,立即将左旋咪唑加入55°C的NGM琼脂溶液中;
3. 左旋咪唑片未接种OP50中;制备后两周内可使用,保存在4°C的容器中;
4. 测定是在实验开始前已将模板降到室温的板上进行的。

Protocol步骤

1. 在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50);
2. 用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移到15毫升无菌试管中;
3. 让虫子静下来。倒出上清液,注意不要扰乱颗粒;
4. 用5ml M9缓冲液进行清洗,短暂摇动或翻转管子;
5. 重复上述步骤,倒出上清,加入3ml M9缓冲液;
6. 数一式三份,计数每10μl中的虫数,计算平均值;
7. 制备悬浮液,得到[35虫/10μl];
8. 将10μl虫液转移至6孔板;
9. 使用wMicroTracker Arena观察蠕虫活动。

注:至少进行3次技术重复,至少进行2次生物重复。

实验结果

实验结果展示了左旋咪唑对N2运动活性的剂量抑制反应曲线,评估不同浓度左旋咪唑(0µM(对照)、100µM和200µM)的治疗效果。在6孔板中,每孔挑选35个年轻成虫N2。在23℃记录4小时的运动活动。数据代表四个独立实验的平均值。

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